原始数据指的是尚未处理过的数据。这些数据需要经过萃取、组织甚至分析与格式化后才能呈现给他人看。为了研究所搜集的资料就是原始数据，也称作主要数据或来源数据。大部分的期刊要求原始数据，这是由于科研界对于科研透明性的呼声日益升高。
倍，100倍。sci免疫荧光先给出一个大视野的整体图，然后放大一定倍数找到一个比较合适的小视野，来展示某个特征部位的细节，需要拍照倍数通常是选择40倍，100倍。免疫细胞荧光是一种可以观察细胞内一种抗原的定位或两种抗原共定位，以及一些信号分子核转位变化的技术。
要统计。定量分析：免疫荧光技术可以用于检测细胞内特定蛋白质的表达和定位，通过统计荧光信号的强度和分布，可以对蛋白质的表达水平进行定量分析，从而更准确地评估实验结果，所以需要要统计。
其实大多数SCI期刊不会要求作者提供原始数据，因为这种会涉及到作者的著作权等相关事宜，很多作者为了保护自己的文章，不愿意公开文章的原始数据，所以一般情况下，作者无需提交原始数据。
1、免疫荧光颜色图片不能看出参数调整了。免疫荧光原始图片是在不影响原属数据的情况下，对图片进行的一种美化技术。经过免疫荧光处理后的原始图片是看不出参数被调整的。
2、**免疫组化AOD平均光密度批量分析**：请参照视频教程学习如何设置相关参数，包括阈值范围和需要勾选的测量参数。具体操作请访问指定网站。确保根据实际图片进行参数调整。 **免疫荧光MFI平均荧光强度批量分析**：调整阈值范围和图片扩展名以适应特定需求。操作步骤请参考视频教程。
1、选择合适的抗体：根据实验目的选择特异性抗体，并确保其与样本中的抗原发生特异性结合。确定荧光染料：选择一种或多种荧光染料标记抗体，以便在荧光显微镜下观察。调整抗体浓度：根据实验需要，调整抗体浓度以获得最佳的荧光信号强度。
2、接着，使用Image-Adjust-Threshold设定阈值，选择默认值以减少人为误差。务必确保只选中信号区域，而避开比例尺（可能影响结果）。选择最适合的阈值算法，如Default，但如有需要，可尝试其他方法以优化选择。
1、在进行IF实验时，优化方法可以节省时间和成本，避免浪费样本。建议设置阳性及阴性对照，确保结果准确性。样本和试剂的存储应适当，尤其考虑到IF中所用抗体和实验样品的荧光性质，最好在完全黑暗的环境中保存，使用琥珀色或铝箔覆盖抗体管。
2、IF-ICC实验遵循基本步骤，每个步骤都需要根据目标抗原特性调整。以下是间接染色过程的简要概述：图 免疫荧光/免疫细胞化学检测步骤 为了确保最佳结果，关键在于针对细胞类型和目标特性调整实验步骤。例如，悬浮细胞需先洗涤并适当重悬，保持适当密度，通过显微镜检查活力。
3、冰冻切片样本：速冻后切片，去除多余OCT，标记疏水边界。染色步骤：封闭样本，一抗和二抗孵育，洗涤后加入DAPI染色并封片。实验中需注意的问题包括对照实验设计、细胞密度控制、荧光信号强度、背景干扰和非特异性染色。选择合适的对照样本，保持适宜的细胞密度，优化荧光标记和洗涤过程，以避免这些问题。
4、在Analyze-Set Measurements中，关键在于勾选Mean gray value和Limit to threshold，这将确保测量的是阈值内的平均值。点击测量（Analyze-Measure），结果将会显示Mean，即所求的平均荧光强度。注意事项与实践技巧 虽然平均荧光强度是定量分析，但免疫荧光实验中的各种因素（如曝光、焦距）可能导致误差。
5、一抗孵育、荧光二抗孵育、复染核（使用DAPI染色）以及封片过程需注意操作细节，如避光、适宜的孵育时间与温度、充分的洗涤步骤等。面对荧光信号弱和背景高的问题，可从样本质量、固定方法、透化方式、二抗选择和信号放大等多个方面考虑解决方案。
